图1 泪腺腺样囊性癌(HE, ×100)

Figure 1 Adenoid cystic carcinoma (HE, ×100)

图2 泪腺腺样囊性癌AB染色显示蓝色黏液(箭头指示)(×200)

Figure 2 AB staining of adenoid cystic carcinoma shows blue mucus (arrows) (×200)

图3 泪腺腺样囊性癌CK染色(+) (箭头指示)(×200)

Figure 3 CK staining of adenoid cystic carcinoma (+) (arrows) (×200)

图4 泪腺腺样囊性癌AB+CK染色(+)(×200)

Figure 4 AB and CK double staining of adenoid cystic carcinoma (+) (×200)

图5 泪腺腺样囊性癌AB+CK染色(+) (×400)

Figure 5 AB and CK double staining of adenoid cystic carcinoma (+) (×400)

实箭头显示为蓝色黏液，虚箭头显示为癌细胞胞质。

The solid arrow is blue mucinous substance, and the dotted arrow shows the cytoplasm of the cancer cells.

      我们在同一张切片上利用AB和CK双重染色技术同时显示黏液物质与癌细胞，有助于观察了解两种成分在泪腺腺样囊性癌发生发展中的关系及相互作用。
     爱先蓝属于阳离子染料，分子中带有正电荷的盐键能够与酸性黏液物质中带负电荷的酸性基团结合而呈蓝色。常采用pH2.5和pH1.0两种爱先蓝染液，用于黏液性上皮肿瘤的鉴别和证明肿 瘤是否含有黏液物质。其中爱先蓝染液(pH2.5)可用于区分黏液肉瘤和脂肪肉瘤，前者阳性而后者阴性。爱先蓝染液 (pH1.0) 显示硫酸化黏液物质。显示一般黏液物质，首先选用爱先蓝(pH2.5)法^[8]。泪腺腺样囊性癌筛状小囊内通常充满嗜酸性的黏液物质^[9]，我们选择爱先蓝(pH2.5)法，效果较好。

     CK(pan)为广谱型细胞角蛋白，主要标记腺上皮、黏膜上皮、鳞状上皮，用于各种鳞状细胞癌、腺癌等的标记。阳性染色部位在细胞质。泪腺腺样囊性癌中癌细胞来源于泪腺上皮细胞，因而胞质CK阳性，呈棕黄色。
     技术要点是：第一，由于AB染色着色较深、着色面较大，避免黏液染色对免疫组织化学染色中细胞抗原物质阳性表达的遮盖，将黏液特殊染色法放在第1步骤；第二，由于在黏液特殊染色中改变了组织切片的pH值，须在做免疫组织化学染色前用PBS缓冲液充分冲洗调整至pH7.4~7.8。
      该方法对于泪腺腺样囊性癌临床病理诊断的意义在于，首先，部分眼科泪腺标本体积较小，分开染色会由于反复切片而导致有诊断意义的病灶部位被切去、无相同部位作对照的情况，在同 一张切片中先进行AB黏液染色然后进行CK免疫组织化学染色，减少了一次切片，避免了组织被反复切片的损失。其次，临床病理诊断中常常因为不同的染色方法显色效果不同，不容易找到相同位置对比观察而影响工作效率。因为分开染色的结果分离，不如双重染色直观。此AB黏液染色与CK免疫组织化学双染就是把细胞内结构和肿 瘤细胞清晰地显示在同一张切片上，易于观察和诊断。此双染技术可以大大方便病理医生判读结果，更有利于观察两者之间的关系。
     总之，良好的双重染色结果对于病理医师进行组织和细胞的对比性和相关性观察，从而得出更加准确和客观的病理诊断具有重要意义。而更为准确客观的病理诊断结果将为临床医生的诊断、治疗提供更为可靠的指导意见。本研究双重染色技术操作简便、方法稳定，颜色反差大、染色效果更具可比性，也减少了一次制片操作，经济、省时，值得推广应用。